Bimolekularna fluorescentna komplementacija (BiFC) metoda je metoda koja se koristi za izravnu vizualizaciju interakcije protein-protein in vivo pomoćuslike živih stanica ili fiksnih stanica. … BiFC su prvi opisali Hu et al.
Kako funkcionira bimolekularna fluorescentna komplementacija?
Načelo rada BiFC-a temelji se na razvoju fluorescentnog kompleksa, kao rezultat povezivanja dvaju segmenata fluorescentnog proteina kada su u neposrednoj blizini zbog interakcije protein-protein u fragmentima, tj., u BiFC-u, fluorofor je podijeljen na amino i karboksilne terminalne krajeve.
Što je BiFC test?
bimolekularna fluorescentna komplementacija (BiFC) test omogućuje jednostavnu i izravnu vizualizaciju proteinskih interakcija u živim stanicama (45). BiFC pristup temelji se na stvaranju fluorescentnog kompleksa kada dva proteina spojena s nefluorescentnim fragmentima fluorescentnog proteina međusobno djeluju (sl.
Zašto se radi BiFC test?
Ideja BiFC-a je izražavanje polovica GFP-a spojenih s vašim interesantnim proteinima Ako POI interaguju, možete spojiti obje polovice kako biste dobili funkcionalni GFP. Dakle, ako postoji jedna polovica GFP-a izražena u stanici, nisam iznenađen da ga GFP antitijelo može otkriti.
Je li BiFC reverzibilan?
Ireverzibilnost BiFC kompleksa dobro je dokumentirana (10) i čini se da je većina, ako ne i svi, fluorescentni proteinski sustavi bazirani na BiFC-u ireverzibilni (8, 33, 43, 48–51).