Može se zamrznuti i odmrznuti RIPA pufer 2-3 puta bez gubitka svoje snage sve dok je pohranjen na ledu tijekom upotrebe (20-30 min). Čuvajte pufer zamrznut na -80 stupnjeva C.
Koliko dugo mogu zadržati RIPA međuspremnik?
1. Ako će se pufer kontinuirano koristiti, preporuča se da se pufer 10x čuva na 4°C 1-2 tjedna. Dulje vrijeme pufer treba čuvati na -20°C. Alikvotiranje 10x pufera preporučuje se ako se treba izvesti mnogo malih eksperimenata.
Može li se RIPA međuspremnik pohraniti na?
Pripremljeni RIPA pufer treba podijeliti na alikvote i pohraniti na −20°C. Dodajte inhibitore proteaze i/ili fosfataze u odmrznuti alikvot prije neposredne upotrebe. Jedan mililitar pufera dovoljan je za lizu približno 5 milijuna stanica. …
Kako pohranjujete RIPA lizate?
Koristite pripremljene lizate što je brže moguće i čuvajte što je kraće moguće. Čuvajte lizate na -80℃ što je dulje moguće. Za lizate koje ćete morati dugo čuvati, premjestite svježe pripremljene epruvete u dostupni zamrzivač na -80℃ kako biste spriječili razgradnju.
Kako odmrznuti RIPA međuspremnik?
Nakon uklanjanja konačne otopine za ispiranje iz stanica, dodajte odgovarajući volumen RIPA pufera (1 ml na 0,5 do 5 × 107 stanica) u staničnu peletu, i kratko promiješajte ili vorteksirajte kako biste potpuno resuspendirali stanice. Inkubirajte na ledu ili u hladnjaku (2–8 °C) pet minuta.