Vrtexing neće smicati vašu RNA kako bi je učinio neupotrebljivom ako radite nasumični početni RT - samo ako želite klonirati dugu mRNA. Invitrogen tehnička podrška također je ispravna. Kloroform je teži od Trizola i potonut će na dno epruvete.
Je li sigurno vrtložni RNA?
Nemojte vorteksirati Trizol lizate ili uzorke RNA kako biste izbjegli smicanje. Nakon ekstrakcije uzorke RNA uvijek držite na ledu. Ovaj protokol je dizajniran za uzorke lizirane od 1 ml Trizola u epruveti od 1,5 ili 2 ml.
Možete li zagrijati RNA?
Stoga, izbjegavajte visoke temperature ( iznad +65°C) jer one utječu na integritet RNA. Umjesto toga, da biste otopili sekundarne strukture, zagrijavajte RNA na +65°C 15 minuta u prisutnosti denaturirajućih pufera.
Kako resuspendirati RNA pelete?
resuspendirajte svoju kuglicu s toplom vodom (40-50 °C). inkubirajte na 45 °C 10 min. stavite ih u +4 na 4-6 sati.
Kako precipitirati RNA?
A.
Nakon prilagodbe koncentracije soli, RNA se može precipitirati dodavanjem 2,5 volumena etanola ili 1 volumena izopropanola i temeljnim miješanjem, nakon čega slijedi hlađenje najmanje 15 minuta na -20° C.