Nitrocelulozne membrane su popularna matrica koja se koristi za upijanje proteina zbog njihovog visokog afiniteta vezanja proteina, kompatibilnosti s raznim metodama detekcije (kemiluminiscencija, kromogenica i fluorescencija), i sposobnost imobilizacije proteina, glikoproteina ili nukleinskih kiselina.
Zašto koristimo nitrocelulozu?
Nitrocelulozna pločica, nitrocelulozna membrana ili nitrocelulozni papir je ljepljiva membrana koja se koristi za imobilizaciju nukleinskih kiselina u južnim i sjevernim mrljama Također se koristi za imobilizaciju proteina u zapadnoj mrlje i mikroskopija atomske sile zbog njegovog nespecifičnog afiniteta za aminokiseline.
Zašto se PVDF koristi u Western blottingu?
Western blotting korištenjem poliviniliden difluorid (PVDF) membrana je jedna od najpopularnijih tehnika za detekciju i karakterizaciju proteina. Ako se ova tehnika kombinira s imunodetekcijom, može se razjasniti ponašanje određenog proteina.
Je li nitrocelulozna membrana hidrofobna?
Za razliku od poliakrilamida, nitroceluloza pruža prikladnu potporu za naknadno bojenje proteina ili imunokemijsku karakterizaciju. Vezivanje na nitrocelulozu pretežno je posredovano hidrofobnom interakcijom (Schneider, 1980), iako mogu biti uključene i elektrostatičke sile (Farrah et al., 1981.
Što je bolje nitroceluloza ili PVDF?
Dok je nitroceluloza krhka i lomljiva, PVDF je izdržljiviji i ima veću kemijsku otpornost što je čini idealnom za ponovno ispitivanje i sekvenciranje. Nitrocelulozu je teško skinuti i ponovno ispitati bez gubitka signala.
