Logo hr.boatexistence.com

Kako napraviti imunofluorescenciju?

Sadržaj:

Kako napraviti imunofluorescenciju?
Kako napraviti imunofluorescenciju?

Video: Kako napraviti imunofluorescenciju?

Video: Kako napraviti imunofluorescenciju?
Video: Kako napraviti zabicu od papira 2024, Svibanj
Anonim

Slijedi pregled različitih koraka protokola neizravne imunofluorescencije bojenja

  1. Planiranje eksperimenta i priprema uzoraka. …
  2. Pričvršćivanje uzorka. …
  3. Permeabilizacija stanica. …
  4. Blokiranje. …
  5. Primarna inkubacija antitijela. …
  6. Inkubacija sekundarnog antitijela. …
  7. Protuboj i montaža.

Kako izvodite imunofluorescenciju?

Svi koraci inkubacije odvijaju se na sobnoj temperaturi

  1. Operite stanice dvaput i pincetom pažljivo stavite pokrovno staklo s prevrnutim stanicama u vlažnu komoru.
  2. Popravite s 4% formaldehida 10 minuta i operite 3 ×.
  3. Permeabilizirajte s 0,1 % TX-100/PBS 15-20 minuta i operite 3 ×.

Kako se koristi imunofluorescencija u stanici?

Protokol imunofluorescencije za adherentne stanice

  1. Sjeme 1–1,5 x104 stanica po jažici stakalca s 4 komore u 500 mL medija kulture. Inkubirajte na 37°C pri 5% CO2.
  2. 32-36 sati nakon zasijavanja stanica, uklonite medij stanične kulture i isperite stanice 3 puta koristeći 500 µL 1X PBS-a.

Što je primjer imunofluorescencije?

Na primjer, istraživač bi mogao stvoriti primarna antitijela u kozi koja prepoznaju nekoliko antigena, a zatim koristiti bojom spojena zečja sekundarna antitijela koja prepoznaju konstantnu regiju kozjih antitijela (" zečja anti-koza" antitijela).

Koja je upotreba imunofluorescentnog bojenja?

Imunofluorescentno (IF) bojenje je široko korištena tehnika u biološkim istraživanjima i kliničkoj dijagnostici IF koristi fluorescentno obilježena antitijela za otkrivanje specifičnih ciljnih antigena. Nakon toga slijedi slikanje, to je vrlo izravna tehnika jer nešto možete vidjeti.

Preporučeni: